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细胞简介：

大鼠脑动脉血管平滑肌分离自脑动脉组织
；脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环；静脉系多不与同名动脉拌行，所收集的静脉血入静脉窦再汇入颈内静脉
；各级静脉都没有瓣膜。它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展
，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形
、三角形或扇形
，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起
，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏
；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状
。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合
，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠脑动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠脑动脉血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基 含FBS
、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%
；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2

、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1

、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基

，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min

，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6

、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品

：

大鼠睾酮(T)检测试剂盒 ，英文名： T ELISA Kit

Porcine ierleukin 17 (IL-17) ELISA Kit 猪白介素17(IL-17)检测试剂盒

志贺氏菌(SH)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMHC-III/H-2III(Mousemajorhistocompatibilitycomplex-III)ELISAKit小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类

体液内毒素比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitCP牛铜蓝蛋白

TNFRSF4重组小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 标签) Protein

RAD23同源物B(RAD23B)重组蛋白 Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)

GMFB重组人 GMFB 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重组人 CD160 蛋白

CX3CL1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 标签)

二氢二醇脱氢酶2(DDH2)重组蛋白 Recombinant Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2)

CD160 Protein Human 重组人 CD160 蛋白

IL1R2重组小鼠 IL1R2 / CD121b 蛋白 Protein

ACVR1B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 标签)

KIR2DL4重组人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白 Protein

小鼠胰淀素(Amylin)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat big endothelin (Big ET) ELISA Kit 大鼠大内皮素(Big ET)检测试剂盒

HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit 人补体片断4b(C4b)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor5-HIAA(Human5-hydroxyindolaceticacid)ELISAKit人5羟基吲哚乙酸

饮料同酸比色法定量检测试剂盒20次

Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠脑动脉血管平滑肌细胞心脂肪酸结合蛋白 (H-FABP)   作用
：   ELISA   规格
：      进口分装

可溶性白细胞抗原 G(sHLA-G)   作用
：   ELISA   规格

：      进口分装

可溶性白细胞抗原 G5(sHLA-G5)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

高迁移率族蛋白 (HMGB1)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系

。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例

、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面

，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化

，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞

，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决

。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞

。收到细胞后次传代建议1

：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。