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细胞简介

：

大鼠肠系膜平滑肌分离自肠系膜动脉组织

；肠道指的是从胃幽门至门的消化管

。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的
，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经门排出体外
。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统
。肠系膜动脉由背大动脉发出的走行在肠系膜内，分布于消化管的动脉。分成肠系膜上动脉和肠系膜下动脉。前者主要分布于小肠左侧，后者分布于结肠
、大肠
、泄殖腔等处
。肠动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一
，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快
，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介
：

实验室分离的大鼠肠系膜平滑肌采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的大鼠肠系膜平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1

、HBV、HCV
、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基
：含FBS、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率

：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件
：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠肠系膜平滑肌体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的培养状态。

实验报告：

一

、分离与培养

：

1
、无菌条件下


，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶


，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下

，用4% BSA封闭细胞30min
；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照

。

公司正在出售的产品
：

大鼠原C(PGC)检测试剂盒
，英文名： PGC ELISA Kit

Mouse aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白5(AQP-5)检测试剂盒

Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforhs-CRPELISAKit大鼠超敏C反应蛋白

细胞NEK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitβOHB大鼠β

F7重组小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein

CCR-4(C-C chemokine receptor 4 0.5mgCCR-4(C-C chemokine receptor 4) 细胞表面趋化因子受体4抗原

DUSP14重组人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 标签) Protein

GPR56 Protein Human 重组人 GPR56 / TM7LN4 蛋白

CCL3 Protein Rat 重组大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白

CCR-4(C-C chemokine receptor 4 0.5mgCCR-4(C-C chemokine receptor 4) 细胞表面趋化因子受体4抗原

GPR56 Protein Human 重组人 GPR56 / TM7LN4 蛋白

F7重组小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein

CCL3 Protein Rat 重组大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白

DUSP14重组人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 标签) Protein

小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 大鼠结合蛋白4(RBP-4)检测试剂盒

HumanC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit 人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-Ab检测试剂盒人肺衣原体抗体(Cpn-Ab)检测试剂盒规格：96T/48T

转基因玉米T14品系试剂盒20次

Humanselenoprotein1,SEP1ELISAKit人硒蛋白1(SEP1)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠肠系膜平滑肌细胞兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项

：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致

，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养

。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系

，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

。