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        重组人趋化因子配体4(无动物源)(CCL4)

        产品名称:重组人趋化因子配体4(无动物源)(CCL4)

        产品特点:重组人趋化因子配体4(无动物源)(CCL4)的相关产品:HER2 receptor(erbB-2 isoform 2 0.5mgHER2 receptor(erbB-2 isoform 2) c-erbB-2受体抗原FGF17 Protein Human 重组人 FGF17 蛋白
        IL1B重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form) Protein

        产品型号 :

        更新日期:2024-11-20

        访问次数:345

        重组人趋化因子配体4(无动物源)(CCL4)的详细资料:

        本产品具有下列特点:

        1.操作简便、快捷 。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

        2. 无放射性 。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

        3. 与MTT相比,使用更安全 。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物 。

        4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。

        商品属性 :

        产品英文名称 :Human CCL4 Protein (Animal-Free)

        产品中文名称:重组人趋化因子配体4(无动物源)(CCL4

        规格:5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

        货号:EY-01X8789
        用途:仅供科研研究实验

        特点&优势:

        表达宿主:大肠杆菌

        种属:

        序列:氨基酸序列来源于:人趋化因子配体4Ala24-Asn92)。

        活性:通过其对转染人 CCR5 BaF3细胞的化学吸引能力来衡量。 ED₅₀的这种效应小于10 ng/mL。

        纯度:>98% ,使用SDS-PAGE检测

        通过LAL法测定,每微克蛋白里内毒素含量<0.1 EU 。

        产品形式:冻干粉 ,冻干缓冲液为无菌的50 mM Tris and 150 mM NaCl, pH 8.5。

        使用中注意事项:开盖使用前,请先离心。本产品为冻干粉,推荐用该产品配套的Reconstit动겸动

        背景

        C-C 基序趋化因子配体4(CCL4)是一种7.66 kDa 的细胞因子,含有69个氨基酸残基。CCL4又称巨噬细胞炎性蛋白 -1β (MIP-1β) ,主要由中性粒细胞、单核细胞、 B 细胞、 T 细胞、成纤维细胞、内皮细胞和上皮细胞分泌。

        重组人趋化因子配体4(无动物源)(CCL4)


        操作步骤 :

        (一)获得目的基因

        1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

        2 、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

        (二)构建重组表达载体

        1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段 。

        2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

        (三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

        1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定 。

        2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作 。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点 。

        3 、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

        (四)诱导表达

        1 、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

        2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

        3 、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。

        4 、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

        5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。

        公司正在出售的产品:

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