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细胞简介
：

脾是重要的器官
，有造血
、滤血、衰老血细胞及参与反应等功能。也是细胞迁移和接受抗原刺激后发生应到、产生效应分子的重要场所
。脾基质细胞是脾脏中结缔组织细胞，起到为脾脏中实质细胞提供支持和营养的作用

。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常脾脏组织。

2)细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%
。

4)不含有 HIV-1、 HBV
、HCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式
：长梭形细胞，不规则细胞
，贴壁培养
。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 Delf原代 基质 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一
、分离与培养：

1
、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min

，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二
、免疫荧光鉴定

：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2

、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min

；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液

、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态
、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面

，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系

，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

。

公司正在出售的产品
：

AIFELISAKit

孕/孕酮(PROG)elisa分析检测试剂盒

PROG ELISA kit

人蛋白S(Protein S)elisa分析检测试剂盒

HumanProteinSELISAKit

小鼠促甲状腺（TSH）elisa检测试剂盒

二苯基甲酰胺（diphenylformamide）

（Mercaptoethylguanidine sodium succinate）

γ-谷氨酰半胱连接酶（GCL）测试盒

KBTBD13蛋白抗体

KBTBD13

卷曲螺旋结构域蛋白75抗体

CCDC75

大鼠摄食抑制因子1(NES1)elisa检测试剂盒

细胞培养悬液氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒

豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)elisa分析检测试剂盒

随机引物DNA探针位素（[α32P]dCTP）聚合酶标记试剂盒

RIT1蛋白抗体

RIT1

驱动蛋白家族成员18A抗体

KIF18A

突触足蛋白抗体  Anti-Synaptopodin

原钙粘蛋白7抗体  Anti-PCDH7

细胞膜钙ATP酶4B抗体  Anti-PMCA4B

FUT3抗体  Anti-FUT3/CD174

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大鼠P21蛋白(P21)elisa分析检测试剂盒

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人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)elisa分析检测试剂盒

大鼠脾基质细胞MPIF-1ELISAKit