使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象 。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释 。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔 、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl ，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部 ，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟 。
4. 配液 ：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤 ：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液 ，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干 。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外 。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5 。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl ，轻轻震荡混匀 ，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl ，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定 ：以空白空调零 ，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。