组织结构 ：
1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激 。使用不含热原和内毒素的试管 。收集血液后，1000×g离心35分钟将血红细胞迅速小心地分离 。
2、血浆：EDTA、柠檬酸盐 、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒 。
3、细胞上清液 ：1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟，取上清液。
5、保存：如果样品不立即使用 ，应将其分成小部分-70℃保存 ，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血 。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤 。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻 。
犬(VE)ELISA试剂盒操作步骤：
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍 。
加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂 ，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔 。在酶标包被板上标准品准确加样50μl ，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀 。
温育 ：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液 ：将30倍(48T 的20 倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜 ，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次 ，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3 。
洗涤 ：操作同5。
显色 ：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
终止：每孔加终止液50μl ，终止反应(此时蓝色立转黄色) 。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行 。
上一篇 胡萝卜素（carotene）ELISA试剂盒针对的几点问题解析 下一篇 犬脑源性神经营养因子（BDNF）ELISA试剂盒常遇见的问题解析