对于间接ELISA标本一般都要进行稀释，如果加样不准就会造成误差，尤其当稀释倍数大时，很小的误差，会导致较大的相对误差 ，使阴性（或弱阳性）标本呈阳性（或阴性）。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部 ，并注意不可溅出 ，不可产生气泡。ELISA试剂盒目前，大部分血站都已使用全自动酶免加样系统处理标本，可较好地避免以上误差 。
在ELISA中正确的洗涤是保证得到可重复结果的关健一步，应引起操作者重视 。无论是手工操作还是机器操作 ，得出不正确的结果常与不正确的洗涤有关 ，ELISA就是靠洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以消除残留在板孔中没能与固体抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
每种试剂都有其反应模式 ，其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高，反应时间长，会造成整板本底高 ，阳性率高。温育一般用湿盒或水浴 ，ELISA试剂盒反应板不宜叠放 ，以保证各板温度都能迅速平衡 ，为避免蒸发 ，板上应加盖。
作为记录测定结果的仪器，酶标仪的性能稳定与否，决定结果的可靠度。首先酶标仪应定期进行保养 ，对滤光片要定期校正；其次酶标仪波长设置要正确，使用双波长，一个检测波长，一个参比波长 ，以消除微孔板底部划痕、不平、指印或液面高度差异造成的光干扰 。此外 ，在用酶标仪读数时先擦试微孔板底部并压平板条。由于各种酶标仪性能有所不同，使用中应详细阅读说明书
综上所述，尽管目前上以及我国有了部分标准血清或参比血清（血清盘），但是酶联免疫吸附技术目前在技术上尚未做到标准化 。受方法学及技术条件的限制 ，在酶联免疫吸附测定中有时不可避免的会出现一定的非特异性，242net必赢可以通过以上措施把非特异性显色降至zui低限底 ，从而提高检测的特异性，并得到更准确 、可靠的实验结果 。