为了更好的使用elisa试剂盒，接下来为大家说一下elisa试剂盒的提纯方法，希望以下介绍对大家有所帮助。
IL-3 鸡白介素3酶联免疫试剂盒分光光度法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 试剂一 ：液体×1瓶，4℃保存。 试剂二 ：粉剂×1瓶，4℃保存 。临用前加10mL蒸馏水溶解。 试剂三：粉剂×1瓶 ，4℃避光保存。临用前加入10mL试剂一，沸水溶解 。试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加50mL蒸馏水溶解。试剂五：液体×1瓶，4℃保存。 标准品：液体×1支，0.25μmol/mL标准酪an酸溶液，4℃保存。自备仪器和用品： 可见分光光度计 、水浴锅 、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、1.5mLEP管和蒸馏水。产品说明： NP在一定的温度和中性pH条件下，催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点 ，中性蛋bai酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品 。 中性条件下 ，NP催化酪蛋白水解产生酪an酸；在碱性条件下 ，酪an酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰 。
操作过程：
一、粗酶液提取：
1.组织：按照组织质量（g） ：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织 ，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g ，4℃离心10min，取上清 ，即粗酶液。2.血清或培养液 ：直接测定。 3.细菌 、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000 ：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一） ，冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g ，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
二 、测定操作： 1.分光光度计预热30min ，调节波长到680nm ，蒸馏水调零。2.试剂二 、试剂三和试剂四置于30℃水浴保温30min。 3.对照管：取一支EP管，加入100μL粗酶液 ，200μL试剂二 ，混匀后置于30℃水浴保温10min ；加入200μL试剂三 ，混匀后8000g ，4℃离心10min ；取200μL上清液，加入新的EP管，再加入1000μL试剂四，200μL试剂五，混匀后置于30℃水浴保温20min，于680nm测定光吸收，记为A对照管。 4.测定管 ：取一支EP管 ，加入100μL粗酶液，200μL试剂三，混匀后置于30℃水浴保温10min；加入200μL试剂二 ，混匀后8000g ，4℃离心10min；取200μL上清液，加入新的EP管 ，再加入1000μL试剂四，200μL试剂五，混匀后置于30℃水浴保温20min ，于680nm测定光吸收，记为A测定管。（注意与空白管不同 ，先加试剂三，后加试剂二） 5.空白管：取EP管 ，加入200μL蒸馏水，1000μL试剂四 ，200μL试剂五，混匀后置于30℃水浴保温20min ，于680nm测定光吸收 ，记为A空白管 。 6.标准管：取EP管，加入200μL标准品，1000μL试剂四 ，200μL试剂五，混匀后置于30℃水浴保温20min，于680nm测定光吸收，记为A标准管。注意：空白管和标准管只需要测定一次。
NP酶活性计算 ：
（1）按蛋白浓度计算 NP活性单位（U）定义：30℃每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol酪an酸为一个酶活单位 。NP活性（U/mgprot）=C标准品×△A测定÷△A标准×V1÷（Cpr×V2）÷T =0.125×△A测定÷△A标准÷Cpr
（2）按样本鲜重计算 NP活性单位（U）定义：30℃每克样品每分钟催化水解产生1μmol酪an酸为一个酶活单位 。NP活性（U/g鲜重）=C标准品×△A测定÷△A标准×V1÷（W×V2÷V3）÷T =0.125×△A测定÷△A标准÷WC标准品：标准酪an酸溶液浓度，0.25μmol/mL ；Cpr ：粗酶液蛋白质浓度 ，mg/mL ；W ：样品鲜重，g； V1：酶促反应总体积 ，0.1mL；V2 ：加入反应体系中粗酶液体积，20µL=2×10-2mL ；V3 ：粗酶液总体积，1mL ； T ：催化反应时间 ，10min 。 注意：若反应较弱，（A测定管－A对照管）差值较小 ，可适当延长反应时间（20-30min），即第一步水浴时间，最后计算酶活时对公式进行修改 。